21-02-2006, 15:01
chichiman a écrit :Au niveau du détergent, j'utilise le nonidet P40 qui permet de casser les membranes cellulaires sans toucher aux récepteurs et autres protéines membranaires.Oui!
Ensuite, bien entendu que je met du Tween 20 % , tu crois quoi ? Sinon, je joue sur le temps de saturation, qui est plus important pour bloquer les sites de fixation non spécifiques.
Pour mon marquage, je met le premier anticorps à room temperature (pas +4°) et overnight sinon, je peux pas assurer le mélange.
Pour la quantité, je dilue au 1000è, ce qui fait du 1 microgramme/ml à peu près.
sinon, je crois qu'on peut jouer aussi sur le temps d'exposition au niveau de la révélation lors du développement photographique.... Non ?
